堇花兰 :杂交

　　蜘蛛兰(Brassia)、齿舌兰(茧donto间lassum)、堇花兰(Miltonia)、茹氐兰(Rodri间uezia)

及萼瓣兰(Zy间opetalum)等，因演化关系密切，遗传性状接近，可进行属间杂交，衍生出很多的人工杂交新属，野猫文心兰(ColmanaraWildcat)是由堇花兰、齿舌兰、文心兰三属杂交而得。白仙女文心兰(D间mramoaraWinterWonderland“WhiteFairy”)是由齿舌兰、蜘蛛兰、堇花兰三属杂交的品种。 （一）RAPD在三色堇杂交育种的应用。从SDS、CTAB、SDS改良法1、SDS改良法2、CTAB改良法等5种方法中选择了SDS改良法2作为三色堇适合的DNA提取方法，同时构建了三色堇DNA的PCR扩增程序，并从Taq酶用量、dNTP浓度、引物浓度、DNA模板用量等方面优化了PCR扩增程序。然后用RAPD分析了18个三色堇自交系的遗传多样性，22个随机引物扩增了167条带，其中127条具多态性，显示自交系间存在较大的遗传变异，用UPGMA法可将自交系聚为五大类，其分类结果与花径和材料来源地基本一致；以其中的5个自交系进行双列杂交试验，研究了RAPD遗传距离与三色堇杂交后代9个性状杂种优势的关系，实验结果表明：RAPD遗传距离仅与花数达到0.1的显著水平，而与其它8个性状杂种优势的相关性不显著，表明用RPAD遗传距离预测三色堇的花数杂种优势具有一定的可靠性。
　　（二）.三色堇的花药培养与再生体系建立。对三色堇花药培养的研究发现，Nitsch或1/4MS基本培养基对花药培养最优，0.3mg/l的2，4-D及4mg/lNAA有利于诱导高频的愈伤，高糖浓度抑制花药愈伤的分化。最优取样时间为初花期，4℃低温预处理时间以2-3天为宜。不同的基因型诱导率差异较大，杂种F1代不一定比亲本的诱导率高。用无菌苗叶柄建立了三色堇再生体系，发现用2，4-D与NAA可产生很高愈伤诱导率，适当的继代培养与TDZ的应用对三色堇愈伤的分化有重要的作用